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Determinación del peso molecular de la lentinana utilizando BeSEC

2026-01-15Application Note

Resumen: La lentinana es un polisacárido bioactivo cuyo peso molecular influye significativamente en sus propiedades inmunomoduladoras y funcionales. En este estudio, se empleó cromatografía de exclusión por tamaño, acoplada con dispersión de luz estática y detección por índice de refracción, para determinar el peso molecular absoluto y la distribución del peso molecular de muestras de lentinana. Esto permite diferenciar claramente entre distintos grados y facilita la selección según la aplicación.
Palabras clave: Lentinana, polisacárido, peso molecular absoluto, distribución del peso molecular, cromatografía de exclusión por tamaño (SEC), dispersión de luz estática

Producto	BeSEC
Industria	Farmacéutica, análisis de alimentos
Muestra	Lentinan (polisacárido extraído de hongos shiitake)
Tipo de medición	Peso molecular absoluto y distribución del peso molecular
Tecnología de medición	Cromatografía de exclusión por tamaño (SEC), dispersión de luz estática

Introducción

La lentinana es un polisacárido bioactivo extraído de los hongos shiitake, ampliamente reconocido por sus efectos inmunomoduladores. Se utiliza comúnmente como adyuvante en la terapia contra el cáncer para aliviar los efectos secundarios de la quimioterapia y la radioterapia. Más allá del ámbito oncológico, la lentinana presenta actividad antiviral y antioxidante, y se incorpora con frecuencia en suplementos de salud para reforzar el sistema inmunológico y ralentizar el envejecimiento. En aplicaciones alimentarias, mejora la textura y la estabilidad, además de aportar valor nutricional.

El peso molecular desempeña un papel fundamental en la funcionalidad de la lentinana. Las moléculas de mayor peso molecular tienden a adoptar estructuras más ordenadas y a unirse con mayor eficacia a los receptores de las células inmunitarias, lo que se traduce en efectos inmunomoduladores más intensos. Por otro lado, las moléculas de menor peso molecular se disuelven y absorben con mayor facilidad, aunque su actividad biológica puede ser de menor duración.

La selección del peso molecular adecuado es esencial para optimizar el rendimiento en aplicaciones específicas.

Sección experimental

Este estudio utilizó un sistema de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) equipado con detectores de índice de refracción (RI) y dispersión de luz (LS). El detector de dispersión de luz es el BeSEC LS2 de Bettersize Instruments, con ángulos de detección de 90° y 7°.La estación de trabajo BeSEC combina señales de dispersión de luz con RI o UV para calcular los promedios de peso molecular (Mn, Mw y Mz) y sus distribuciones.

Configuración del sistema

Detectores: Dispersión de luz (LS) + Índice de refracción (RI)
Columna: Shodex Ohpak LB-806M
Fase móvil: Solución acuosa de NaNO₃ 0,05 M
Caudal: 0,7 mL/min
Volumen de inyección: 100 μL
Temperatura de la columna: 40 ℃
dn/dc: 0,129 mL/g

Preparación de la muestra
Se analizaron cinco muestras de lentinana. Cada muestra en polvo fue pesada con precisión y dispersada en una solución de NaNO₃ 0,05 M, agitándose hasta obtener una solución clara (1–3 mg/mL). Posteriormente, se filtró mediante un filtro de jeringa PES de 0,22 μm, se transfirió a viales y se colocó en el autosampler para su medición.

Resultados y discusión

Figure 1. Perfiles de elución de las señales de múltiples detectores (arriba) y distribución del peso molecular (abajo) para la Muestra A

Figure 2. Perfiles de elución de las señales de múltiples detectores (arriba) y distribución del peso molecular (abajo) para la Muestra B

Figure 3. Perfiles de elución de las señales de múltiples detectores (arriba) y distribución del peso molecular (abajo) para la Muestra C

Figure 4. Perfiles de elución de las señales de múltiples detectores (arriba) y distribución del peso molecular (abajo) para la Muestra D

Figure 5. Perfiles de elución de las señales de múltiples detectores (arriba) y distribución del peso molecular (abajo) para la Muestra E

Las Figuras 1 a 5 muestran los cromatogramas de las cinco muestras de lentinana. La señal de índice de refracción (RI) se representa en azul, la señal de dispersión de luz en ángulo recto (RALS) en verde y la señal de dispersión de luz a bajo ángulo (LALS) en rojo. La distribución del peso molecular, representada mediante una línea púrpura, muestra el peso molecular en función del tiempo de elución.

En todas las muestras, las señales son limpias, con líneas base planas, bajo nivel de ruido y una alta relación señal/ruido. En la Figura 1, el perfil de peso molecular disminuye de forma continua con el volumen de elución, en concordancia con los principios de la cromatografía de exclusión por tamaño (SEC), donde las especies de mayor tamaño eluyen primero, seguidas por las de menor tamaño. Los picos de dispersión no presentan colas y la curva de peso molecular se mantiene estable al final, lo que indica una separación eficaz basada en el tamaño.

Table 1. Resultados del peso molecular de las muestras de lentinana

No.	Mn (kDa)	Mw (kDa)	Mz (kDa)	Mw/Mn
Sample A	3559	4465	6128	1.25
Sample B	3218	6222	23741	1.37
Sample C	2903	4168	5676	1.13
Sample D	150.8	204.5	360.45	1.3
Sample E	29.2	37.1	47.5	1.27

La Tabla 1 resume los resultados de peso molecular de las cinco muestras. Se observaron diferencias significativas en el peso molecular, lo que influye directamente en la solubilidad, la viscosidad, la actividad biológica y el comportamiento en formulación. En consecuencia, cada muestra puede ser más adecuada para distintas aplicaciones.

Conclusión

Este estudio demuestra el uso del detector de dispersión de luz BeSEC LS2 para caracterizar el peso molecular de muestras de lentinana. Los resultados revelan variaciones sustanciales en el peso molecular entre las cinco muestras, proporcionando información clave para la selección del grado adecuado en aplicaciones farmacéuticas, nutracéuticas o alimentarias.